Rastreamento gênico da neoplasia endócrina múltipla tipo 2: experiência da Unidade de Endocrinologia Genética da USP / Genetic screening of multiple endocrine neoplasia type 2: experience of the USP Endocrine Genetics Unit

A neoplasia endócrina múltipla tipo 2 (NEM-2) é uma síndrome tumoral hereditária que compreende: carcinoma medular de tireóide, hiperparatiroidismo primário, feocromocitoma e outras doenças não-endócrinas. Desde a identificação das primeiras mutações missense no RET associadas ao NEM-2, a detecção de mutações no RET adquiriu grande impacto no tratamento clínico da NEM-2, tais como o pronto diagnóstico e tratamento do CMT. Atualmente a tireoidectomia total possibilita real cura dos casos de CMT nos quais os diagnósticos moleculares foram efetuados precocemente. Depois de identificadas as mutações no RET, os demais familiares devem ser rastreados para esta mutação utilizando-se métodos como DGGE, SSCP, enzima de restrição, seqüenciamento e mini-seqüenciamento gênico. Apresentamos uma breve revisão da nossa experiência com seqüenciamento gênico direto do RET e DGGE. Em 50 pacientes com NEM-2 analisados por ambas as técnicas, não encontramos falsos resultados, sugerindo que o DGGE é uma metodologia de rastreamento adequada para mutações no proto-oncogene RET.

Abordagem clínica e laboratorial do bócio uninodular sólido: vantagens da determinaçäo da calcitonina sérica por métodos distintos no rastreamento do carcinoma medular de tireóide, forma esporádica / Clinical and laboratorial approach of solid uninodular goiter: advantage of serum calcitonin determination by different methods in medullar thyroid carcinoma screening, sporadic form

A apresentação clínica mais freqüente da forma esporádica do carcinoma medular da tireóide (CMT) é o bócio uninodular sólido (BUS), apresentação esta semelhante aos demais tumores que afetam a glândula. O estabelecimento da freqüência de CMT em BUS apresenta implicações importantes não só diagnósticas, como também terapêuticas, visto a abordagem cirúrgica do CMT diferir de outros tumores tireoideanos. Para investigar a prevalência de CMT em BUS, dosamos calcitonina (CT) sérica, marcador bioquímico do CMT, por métodos distintos (RIA e IRMA) em 60 casos (55 mulheres; com idades entre 22 e 75 anos). A análise citológica obtida através de punção biópsia (PAAF) revelou 100 por cento de especificidade e 67 por cento de sensibilidade na detecção de carcinoma de tireóide. Considerando-se o grau de suspeita clínica para neoplasia tireoideana e os achados anatomopatológicos, houve 60 por cento de correlação positiva. CMT foi diagnosticado através da elevação da CT sérica em um dos 59 casos (1,69 por cento) e confirmado posteriormente pela PAAF e anatomopatológico. A incidência de CMT entre os casos de neoplasias tireoideanas nesta amostra foi de 12,5 por cento (1/8). Concluímos que a dosagem rotineira da CT sérica em casos com BUS não só complementa o estudo desta doença, como auxilia fortemente no diagnóstico do CMT. Tanto o IRMA como o RIA mostraram-se métodos úteis no rastreamento do CMT. Entretanto, o RIA pode provavelmente detectar ainda mais precocemente a elevação de formas não monoméricas da molécula de CT, as quais nos casos de CMT são usualmente mais abundantes que as formas monoméricas.

Perda do sítio de restriçäo fok-I no codon 918 do proto-oncogenese RET na neoplasia endócrina múltipla tipo 2B / Fok-1 restriction site loss in codon 918 of RET proto-oncogene in type 2b multiple endocrine neoplasm

Descreveu-se o uso de método simplificado de detecção de perda do sítio de restrição que envolve o codon 918 do protooncogene RET, usando-se digestão direta com a enzima de restrição fok-I. Este método foi aplicado na análise do DNA genômico do sangue periférico de uma paciente com neoplasia endócrina múltipla tipo 2B (NEM-2B), seus pais e irmão. Descartou-se a existência da mutação nos parentes e confirmou-se padrão eletroforético de DNA compatível com mutação no codon 918 na paciente estudada. Estes achados sugerem que esta mutação tenha ocorrido durante a gametogênese de um dos pais da afetada. Com este método elimina-se a necessidade do seqüenciamento gênico direto, economizando tempo e gastos com o exame. Propõe-se que este procedimento possa ser usado na detecção desta mutação em indivíduos pertencentes ao grupo de risco para NEM-2B, desde que cerca de 93 por cento dos pacientes com esta doença apresentam mutação no codon 918.

Calcitonina: fisiologia e deficiência / Calcitonin: physiology and defficiency

O desenvolvimento e o aprimoramento das técnicas de dosagem da calcitonina sérica (CT) (radioimunoensaio e ensaios imunométricos), os avanços da biologia molecular, abriram novas e interessantes perspectivas, permitindo amplicar o conhecimento acerca da CT, este hormônio tantas vezes dito "sem funçao". Nesta revisao, sao discutidos aspectos históricos, estruturais e moleculares da CT, os métodos de dosagem, a importância e utilidade dos testes provocativos, sobretudo no diagnóstico do câncer medular da tireóide. Além disso, sao abordados os principais aspectos fisiológicos conhecidos, bem como as condiçoes caracterizadas por deficiente reserva secretóia de CT como no hipotireoidismo congênito, na tireoidite crônica autoimune, em pacientes tireoidectomizados e em mulheres no período pós-menopausa.

Niveis sericos de hormonio de crescimento na sindrome de Hunter / Serum growth hormone levels in Hunter's syndrome

Os niveis sericos de hormonio de crescimento (GH) foram estudados em tres irmaos com sindrome de Hunter (Mucopolissacaridose tipo II). A dinamica da secrecao do GH foi analisada por meio de testes com insulina (0,05 UI/Kg, i.v.), glicose (1,75 g/Kg, v.o.), lisina vasopressina (LPV) (5 ou 10 UI, i.m.) e L-Dopa (500 mg, v.o.). Os niveis basais de GH durante os quatro testes eram elevados (X = 14,2 ng/ml) nos tres casos. As respostas do GH ao estimulo com insulina e LPV mostraram tendencia a apresentar uma correlacao direta com a idade dos casos analisados, sendo maiores no paciente mais velho. Ao contrario dos dois outros casos, no teste com L-Dopa o paciente mais velho nao mostrou elevacao de niveis de GH. Apos administracao de glicose, os niveis de GH se deprimiram, como esperado nos tres casos. Como valores basais de cortisol e prolactina eram usualmente normais durante estes testes, nao se valorizou a hipotese de que o stress fosse o unico causador dos valores basais elevados de GH. Para tentar melhor esclarecer estes achados, dosaram-se os niveis de GH sob condicoes basais de 20-20 min., durante 120 min.; nos tres casos as medias destes valores de GH eram normais nos casos 1 e 3, enquanto tendiam a se elevar no caso 2. Valores da somatomedina-C eram normais-baixos nos tres casos...

Detecçäo precoce do carcinoma medular de tireóide / Early detection of the medullary thyroid carcinoma

Vinte e oito parentes de 11 pacientes com carcinoma medular de tiróide (CMT) foram testados, sendo que dois destes 11 pacientes apresentavam neoplasia endócrina múltipla tipo II. O teste combinado constou de infusäo endovenosa de 2mg de Ca++/kg de peso por 60seg, seguida imediatamente de infusäo de 0,5mcg de pentagrastrina/kg de peso, por 5seg . A calcitonina (CT) sérica foi dosada aos 0, 2, 5 e 10min. Os valores máximos da CT sérica em indivíduos normais foram considerados como 95 e 350pg/ml, em condiçöes basais e após estímulo, respectivemente. Diante de valores anormalmente elevados de CT durante o primeiro teste, um segundo teste foi realizado para confirmar o diagnóstico de hipersecreçäo do CT. Em dois entre 28 casos, estudados, fêz-se o diagnóstico precoce do CMT pelos níveis excessivemente elevados da CT, visto ser este o marcador específico desta neoplasia. A tireoidectomia total e a limpeza ganglionar preventiva foram indicadas em ambos os casos. Os achados patológicos e da imunocitoquímica confirmaram a presença do CTM nos dois casos. Nestes casos, após a cirurgia, os níveis de CT sérica se mantiveram constantemente normais até o presente (18 meses após a cirurgia). Estes achados reforçam a hipótese de cura do CMT em ambos casos. O feocromocitoma e o hiperparatireoidismo foram investigados nos 28 casos, sendo que em dois o hiperparatiroidismo foi suspeitado e está sob atual investigaçäo. Sumarizando, documentou-se a importància do aprofundamento no estudo de parentes de pacientes com CMT, por meio de dosagem de CT. Este procedimento pode levar ao diagnóstico e tratamento precoces desta neoplasia, permitindo eventual cura do paciente.

Detecçäo precoce do carcinoma medular de tireóide na neoplasia endócrina múltipla tipo II / Early detection of medullary thyroid carcinoma in multiple endocrine neoplasia type II

Fez-se diagnóstico precoce do carcinoma medual de tireóide em dois dos seis filhos de dois dos seis filhos de dois pacientes com neoplasia endócrina múltipla tipo II. para isto, usaram-se dosagens séricas de calcitonina durante o teste estimulatório combinado com 2 mg de Ca++/Kg de peso ou 0,5 mcg/Kg de peso de pentagastrina. Respostas exageradas (> 350 pg/ml) em dois testes feitos em diferentes dias, documentaram o diagnóstico deste tumor nos dois casos. A tireoidectomia total foi indicada e realizada em ambos os casos, associada à ressecçäo preventiva dos gânglios linfáticos do quadrilátero central do pescoço. Os exames anátomo-patológico e imunocitquímico para calcitonia documentaram em ambos os casos dois nódulos com características de carcinoma medular de tireoide, ao lado de extensas áreas de hiperplasia das células C. O eventual surgimento de feocromocitoma e/ou hiperpartireoidismo continua a ser periodicamente investigado nestas duas irmäs. A queda abrupta dos níveis de calcitonina no pós-cirúrgico e a persistência de níveis normais 18 meses após a cirurgia, indicam cura do carcinoma medular de tireóide em ambas as irmäs. Em uma segunda família, detectou-se filho de afetado com neoplasia endócrina múltipla tipo II com fortes indicaçöes de presença de hiperparatireoidismo, mas o paciente näo mais retornou ao hospital. Confirmou-se a validade da dosagem da calcitonina sérica como marcador tumoral do carcinoma medular da tireóide e do índice de cura no pós-cirúrgico, ao lado do antígeno carcinoembriônico